探索生命《生物學》101-2
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1.
另一種殖入基因的方法是，先合成含有目標基因的DNA副本，再將這些基因殖入細菌中。
2.
這個反應程序，先從細胞離析出具功能性（官能性）的mRNA，這段mRNA上有我們想要的基因，然後，用這段mRNA為模版，去合成與它互補的基因－反向轉錄的基因/互補的基因。
3.
這個反應程序的關鍵步驟是，找到能夠生產特定基因產物的細胞，例如，如果我們想要的產物是胰島素，那麼，就需要胰臟細胞，因為能夠生產胰島素的就是胰臟細胞。
4.
這類細胞含有高濃度的官能性mRNA分子，這些mRNA分子上記載特殊基因的密碼，並且這些mRNA已經在細胞核內移除內插子（內插子是無用的基因）。
5.
有許多技術可以離析出特定種類的mRNA，離析的方法是依據mRNA的物理性質，例如重量，應用這個方法可將特殊細胞內的大量mRNA離析出來。還有各種方法可以辨識mRNA上極少轉錄的基因。
6.
一旦離析出適當的mRNA，下一步是製造與它互補（配對）的DNA股，利用某些病毒的特殊酵素，催化反應，從「mRNA模版」上合成「DNA副本」，執行此反應的酵素稱為反轉錄酶reverse transcriptase。
7.
這種酵素稱為反轉錄酶是因為它的複製順序，違背一般從DNA轉錄資訊到RNA的順序，而與RNA配對製造的DNA股，稱為反轉錄的DNA complementary DNA ，or cDNA。
8.
從RNA反轉錄而來的DNA是單股的，接著酵素沿著「單股的DNA」複製產生「雙股的DNA」，然後，將這「雙股的DNA」插入「質體」（細菌宿主染色體群以外，比較零碎的DNA環）。
9.
反轉錄DNA插入質體的程序，與外來DNA插入質體的程序相同：
首先，用限制酶切開質體，切開的位置產生成對的黏狀末端，cDNA也有成對的黏狀末端；因此，當cDNA與質體混合，黏狀末端成對的鹼基就黏合起來。接著，再由連接酶ligase修復DNA骨架，然後細菌宿主再吞入帶有cDNA的質體。
10.
這種基因殖入法有二個優點：
一、它省略了從廣大基因庫裡，修整出想要的基因的昂貴程序。因為cDNA裡只有恰當有用的基因，沒有垃圾基因（內插子），原核細胞無法解讀的內插子，已經在製造官能性的mRNA中被移除了。
二、基因改造後的細菌細胞，很快地繁殖分裂產生大量的細菌細胞；這些改造後的細菌能夠大量地合成我們想要的產物，特別是當細菌宿主的質體，有強化轉錄cDNA的訊號時，生產力更強。
11.
除了胰島素，這個技術也用來大量生產其他種類的荷爾蒙，例如生長激素growth hormone。人工合成的牛生長激素，使用在催乳上，可提高牛乳產量10至40%；人工合成的人類生長激素，能預防缺乏某些荷爾蒙的孩童發育不健全。
12.
有一種有機體自然生產出來的荷爾蒙，稱為干擾素interferon，它能治療癌症和許多種病毒感染的疾病，現在因為基因重組技術可以合成干擾素的關係，干擾素被廣泛運用在實驗與醫療上。
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