2013年8月26日 星期一

基因重組技術可用來繪製染色體的基因圖譜 Recombinant DNA Techniques Can Be Used for Mapping Genes on Chromosomes

探索生命《生物學》103
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1.        新的DNA重組技術,不僅能使宿主細胞成為生產醫藥的化學工廠,也能用鑑定真核細胞的基因序列與基因活性。事實上,DNA重組技術的其中一個用途就是,精準地定位(定序)基因
2.        從細胞離析出來的訊息RNAmRNA),在含有輻射性的同位素32P的介質中,生產並拷貝許多反轉錄DNAcDNA
3.        染色體雙的股螺旋DNA分割而成的單股DNA,與放射性的反轉錄、單股DNA混合後,按照鹼基配對恢復為雙股螺旋DNA;此時,輻射性的DNA便成為定位特定基因的探針,精準地定位出該基因的位置。
4.        徐弘毅注:基因工程研究人員,用特定種類的mRNA製作輻射性的反轉錄DNA,再將具有輻射性的反轉錄DNA嵌入染色體中,旦一發現DNA的某一個位置的基因有輻射性,就可以確定那裡的基因是生產特定種類的mRNA的基因。(完)
5.        人類的46個染色體中,有超過2000個基因與DNA辨識區域已經定序出來了,其中包括導致囊狀纖維化症 cystic fibrosis、肌肉萎縮症muscular dystrophy、亨丁頓跳舞症 Huntington's disease、鐮刀型貧血症sicklecell anemia與某些癌症的致病基因。
6.        現在,基因重組技術結合其他相關技術進行「人類基因體計畫Human Genome Project」,繪製人類染色體的基因圖譜;
7.        這個大計劃的第一步是,定序出每條染色體上的基因,然後辨識已被定序的基因的核甘酸序列,最終的目標是找出人類基因體的所有核甘酸序列。
8.        近期的統計推測,人類的基因數大約在5萬到10萬之間,DNA上大約有30億對鹼基,這是一個龐大的計畫,執行此計畫的花費十分可觀,每年大約花費150萬美元,「人類基因體計畫Human Genome Project」的總經費為30億美元。
9.        對「人類基因體計畫」投入這麼龐大的經費是否值得的爭論相當多,特別是其他的計畫所需的經費將因此而被排擠,並且其他基因工程計畫的人才也都將轉而投入這個大計劃,所有人力物力都在解決染色體的基因序列,而其中有90%~99%DNA從未被轉譯。
10.     為什麼要繪製人類基因體的圖譜?這樣昂貴的代價值得嗎?基因圖譜的繪製與基因定序確實在診斷基因疾病方面有效,並且我們有可能因此治好基因導致的身體缺陷。基因定序能提供許多關於「基因運作」、「不同基因之間的交互作用」與「調控基因的機制」等資訊。
11.     此外,不同物種之間的基因序列比較結果,能夠幫助我們瞭解生物的演化過程。舉例來說,人類與猿猴的DNA序列十分相似,由此推測,4百到6百年前這段時間,我們人類從猿猴分化而來。
12.     徐弘毅:人類基因計畫最大的價值,不是基因圖譜潛在的經濟價值,而是人類全力以赴探索未知的領域這件事,培養所有研究者冒險進取的拓荒者精神
13.     並且,當全世界頂尖科學家一起克服個人與現實的種種困難,尋找答案的過程,能夠學習到團隊精神、四海一家;科學界無私地將研究成果奉獻給所有需要基因圖譜知識的陌生人,確實做到愛人如己;最後科學界必須訂出應用基因圖譜的規範,避免知識被濫用,確保生態的永續發展,這是法治訓練的基礎。(完)

DNA重組技術廣泛用於農業上 Recombinant DNA Technology Has Various Agricultural Applications
14.     有些DNA重組技術已經能夠用於農業。可以減低植物霜害死亡率的基因改造細菌,已經有限度地商業化了。
15.     研究人員已經能夠將除草、防蟲和抗病基因殖入許多種植物體,現在,這些轉殖技術還有新的應用:研究人員將蛋白質基因,例如人類白蛋白human albumin干擾素interferon,殖入農作物,例如蕃茄、煙草,讓這些植物能夠合成人類需要的蛋白質。
16.     當科技愈來愈進步,用來製造商品的農作物品種也愈來愈多,或許有一天,人類可用農作物生產油品。
17.     展望未來,有些研究人員認為,可用基因重組技術,將固氮基因殖入農作用中,這樣就不需要施用氮肥了,然而,如果許多植物都基因改造成可從空氣中吸取氮氣當肥料,也會有很多風險,因此短時間內不會這樣做。
18.     徐弘毅注:如果植物都能夠直接攝取空氣中的氮氣當氮肥,會有什麼後果?
一、植物自行吸收氮肥,將使得植物長得太茂盛,可能會造成綠癌,破壞自然生態。
二、大氣中的氮氣比例下降,那麼其他氣體比例就會相對地上升;如果比例上升的是二氧化碳,大氣中的二氧化碳過多,會造成溫室效應問題;
如果上升的是氧氣,大氣中的氧氣太多,容易發生大火而難以熄滅,例如森林大火、油井大火;
如果氮氣比例下降,造成地表下儲存的沼氣加速溢出,空氣中甲烷等氣體過多,那對動物界來說不但是空氣品質下降,也十分容易引起火災。(完)
19.     基因重組技術,能將基因轉殖到家畜身上。研究人員可用病毒或基因顯微注射改變細菌的基因,帶有外來基因的成長激素,就是用這個方法添加到豬或牛身上,使改造後的品種長得更大隻卻含有較少的脂肪,
20.     然而,這些改變會造成生物體內某些器官負擔過重,這也是基因重組技術有待更完整瞭解之處。
21.     徐弘毅:地球上的自然生物是經過長久「物競天擇,適者生存」之後的優勝者,因此,這些生物的器官與肌肉骨骼比例,在目前地球環境下是最完美的、最有生存競爭力的。
當人類為了自己的需要改造家畜基因,只提高家畜的肌肉比例,不管其他部分,一定會發生家畜原本的內臟器官無法負荷的狀況,因為家畜原本的內臟器官,是依據牠們原本的肌肉骨骼與生存環境而設定的。

n   翻譯編寫 Carol H. McFadden and William T. Keeton Biology

2013年8月24日 星期六

含有提供者基因的DNA經由特殊程序殖入真核細胞 Special Procedures Must Be Used to Get Donor DNA Into Eucaryotic Cells

探索生命《生物學》102
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1.        到目前為止,我們只討論到,將帶有提供者基因的DNA輸入細菌細胞(原核細胞),與讓宿主細胞生產特定蛋白質的程序;但是如果轉殖的目標是,將基因輸入真核細胞,以修復壞損的基因或增加新基因的話呢?
2.        噬菌體和質體能夠扮演好載體的角色,將DNA送進細菌,但是這些噬菌體和質體這類載體,通常沒辦法進入真核細胞,那我們該怎麼讓目標基因進入真核細胞呢?
3.        有許多將DNA輸入真核細胞的技術,用的是物理上的方法。有一種方法是,將DNA包覆在小粒的鎢丸表面,將這個黏滿DNA的鎢丸射入宿主細胞中,將新的DNA併入到宿主的染色體中。
4.        雖然這種作法看起來很粗糙,並且成功率很低,但是它成功地將DNA引介到植物與動物的細胞中。
5.        近年來,研究人員利用這個技術將外來的基因輸入葉綠體的DNA,增強植物行光合作用的效率或抗病力。
6.        另一種輸入基因的方法是,顯微注射技術microinjection techniques;顯微注射技術用很細的針將DNA注入細胞核,這個方法的成功率非常低,大約10,000個細胞中,只有1個細胞成功得到新基因。
7.        另一種輸入基因的新方法稱為電穿孔法electroporation,產量較高。電穿孔法,將細胞暴露在高伏特的短暫電衝下,讓電流短暫地破壞細胞膜,造成細胞膜出現許多孔洞,使DNA這類小型分子,能夠經由膜上的破洞進入到細胞裡面。不過,電穿孔法是有缺點的,它會殺死許多細胞。
8.        植物的基因轉殖技術,使用一種會造成植物罹患癌腫病的細菌;這種細菌裡有10個基因組成的質體,它會造成植物罹患癌腫病;細菌沒有這種質體,便不會造成植物生病。
9.        當癌腫病的細菌感染了植物細胞,它會將自己的質體,輸入宿主的染色體;質體上的外來基因,也順勢進入植物細胞。
10.     研究人員使用導致癌腫病的細菌質體,將抗除草劑、抗蟲、抗病的基因輸入煙草矮牽牛中,改良基因;然而,並非所有的植物都會被癌腫病細菌感染,所以研究人員必須再找其他的載體。
11.     植物是應用基因轉殖技術特別好的標的物,因為有許多種植物,殖入1個基因轉型的植物細胞後,整株都起了變化,成為新品種的植物;
12.     這樣說來,不需要改變整株植物體的細胞,只要改造1個植物細胞,就能培養出每個細胞都基因轉型的新品種植物。

聚合酶鍊反應可用來放大DNA序列 The Polymerase Chain Reaction Can Be Used to Amplify Sequences of DNA
13.     聚合酶鍊反應 polymerase chain reaction, PCR是一門新的基因工程技術,聚合酶鍊反應能夠將少量的DNA序列反覆複製成數百萬份拷貝。然後再分析放大後的基因資訊。
14.     此反應程序使用的是在高溫下十分穩定的DNA聚合酶;這種DNA聚合酶來自於生活於接近沸點的溫泉水中的細菌
15.     聚合酶在充足的時間下生產新DNA完畢,接著,用熱能將新生產DNA各股分開,繼續下一輪的複製工作;複製工作一輪又一輪地持續下去,直到複製出足夠數量的拷貝版DNA。整個反應程序在活細胞的外面進行,大約會花數個小時。
16.     聚合酶鍊反應機制PCR machines,已經發展出一套反覆數輪的複製程序。PCR已經變成非常有力的研究工具,而且這項技術的用途也是日新月異。
17.     舉例來說,一個精子細胞的DNA放大之後,便能夠提供足夠的研究材料。犯罪現場遺留的精液、血跡或一根頭髮的毛囊,憑著聚合酶鍊反應PCR技術,就能辨識出它們出自於誰。
18.     聚合酶鍊反應機制PCR技術已廣泛用於醫藥。因為聚合酶鍊反應機制PCR只需要稀少的樣本,因此遺傳疾病的產前檢查,與辨識還處於低度感染階段的病毒與細菌等致病有機體,都可利用PCR技術完成。
19.     最近PCR技術用於為器官捐贈者與受贈者的基因配對PCR技術可以於釐清有機體之間的演化關係,木乃伊、長毛象和其他絕種動物,都是用PCR技術,從他們的骨骼中取出DNA樣本而分析出來的。

n   翻譯編寫 Carol H. McFadden and William T. Keeton Biology》;圖片來源/中國科普博覽Biochem.arizona.eduintechopen.comBio.utexas.eduTutorvista.comWikipedia.org